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目的:将碘化钾法和试剂盒法相结合,建立一种安全无毒、快速、经济、有效的提取全血基因组DNA的方法.方法:用0.2% NaC1裂解红细胞收集全血中的白细胞,用5 mol/L KI裂解白细胞膜,再用试剂盒提取DNA,采用紫外分光光度仪、凝胶电泳、荧光定量PCR进行检测.结果:本法提取300 μL抗凝血可得基因组DNA 5~12 tμg,D260nm/D280nm为1.86±0.02.原本提取100次全血基因组DNA的试剂量提升到可提取200次.结论:改良法提高了试剂盒的使用率,所得基因组DNA稳定,是一种操作简便、快速高效并节省试验经费的提取方法.

作者:吕晓岩;肖苒

来源:生物技术通讯 2015 年 26卷 6期

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作者:
吕晓岩;肖苒
来源:
生物技术通讯 2015 年 26卷 6期
标签:
基因组DNA 提取方法 外周血 荧光定量PCR genomic DNA extraction method peripheral blood real-time PCR
目的:将碘化钾法和试剂盒法相结合,建立一种安全无毒、快速、经济、有效的提取全血基因组DNA的方法.方法:用0.2% NaC1裂解红细胞收集全血中的白细胞,用5 mol/L KI裂解白细胞膜,再用试剂盒提取DNA,采用紫外分光光度仪、凝胶电泳、荧光定量PCR进行检测.结果:本法提取300 μL抗凝血可得基因组DNA 5~12 tμg,D260nm/D280nm为1.86±0.02.原本提取100次全血基因组DNA的试剂量提升到可提取200次.结论:改良法提高了试剂盒的使用率,所得基因组DNA稳定,是一种操作简便、快速高效并节省试验经费的提取方法.

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