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帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。多巴脱羧酶（ DDC）是帕金森病研究的靶点蛋白之一，但是目前没有高通量的测活模型。因此，需要构建一种高通量多巴脱羧酶抑制剂的筛选模型，用于发现新型抑制剂。采用克隆表达纯化得到多巴脱羧酶和用于酶偶联反应的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ PEPC）。基于一系列酶联反应将CO2固定，检测其含量，从而测定多巴脱羧酶的活性。结果得到人源多巴脱羧酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的体外纯酶，建立了一种高通量筛选模型，并且从70个天然化合物中，筛选得到2个多巴脱羧酶的抑制剂。成功构建了一种基于体外纯酶高通量多巴脱羧酶抑制剂的筛选模型。
作者：张缘缘；邱军强；周越洋；吴方；张庆华
来源：生物学杂志 2014 年 6期
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