目的 探讨骨形态发生蛋白腺病毒表达载体(Ad-BMP-2)和转化生长因子-β1.腺病毒表达载体(Ad-TGF-β1)共转染人退变椎间盘髓核细胞后对aggrecan和Ⅱ型胶原合成的影响.方法 人退变椎间盘髓核细胞体外分离培养至第2代.为检测转入目的 基因后蛋白表达情况,将其分为空白对照组、目的 基因组和共转染组,细胞分别转染Ad-BMP-2(50MOI)、Ad-TGF-β1(50 MOI)及共转染(各50 MOI),再用Western blot方法检测转染后细胞目的 蛋白的表达;为探讨目的 基因对细胞外基质代谢的影响,将研究对象分为空白对照组(A组)、Ad-BMP-2 100MOI(B组)、Ad-TGF-β1100 MOI(C组)、Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1各50 MOI(D组),用EUSA法分别检测转染第3天和第6天细胞上清液中aggrecan和Ⅱ型胶原的蛋白表达量.RT-PCR检测第6天髓核细胞内Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA的表达水平.应用方差分析比较组间差异,以P<0.05表示差异有统计学意义.结果 在转染目的 基因载体后,目的 蛋白表达增加.在转染后第3天和第6天各转染组细胞培养基中aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量高于对照组(P<0.01),与转染单个基因组相比,共转染组的aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量明显增加(P<0.01);并且在转染后第6天共转染组髓核细胞内aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA表达也明显增加(P<0.01).结论 转染A

作者：顾海伦；刘莉；王欢；段景柱；李建军

来源：生物医学工程与临床 2009 年 13卷 1期