目的:探究TRIM2 通过泛素化修饰PKM2 调控肝癌细胞糖酵解的机制.方法:TCGA和CPTAC数据库分析TRIM2 基因及蛋白表达水平,并结合病人生存状态进行相关性分析.构建HepG2-shNC和HepG2-shTRIM2 细胞株,细胞能量代谢仪检测两组细胞胞外酸化率和耗氧率,并测定细胞葡萄糖吸收率、乳酸产生量、ATP水平.免疫共沉淀验证TRIM2 和PKM2 在HepG2、HEK293T细胞中相互作用,免疫荧光检测PKM2 和TRIM2 共定位.免疫共沉淀检测在HepG2/HEK293T细胞中敲低/过表达TRIM2 后PKM2的泛素化修饰水平,体外酶催化反应检测在HepG2/HEK293T细胞中敲低/过表达TRIM2 后PKM2 酶活性.Transwell小室法检测 HepG2-shNC 和 HepG2-shTRIM2 细胞侵袭和迁移能力.皮下移植瘤实验检测HepG2-shNC和HepG2-shTRIM2 细胞体内成瘤能力.结果:TCGA和CPTAC数据库分析发现TRIM2 在肝癌组织中mRNA及蛋白表达水平均升高,高TRIM2 表达预示差的患者生存状态.TRIM2 表达水平与糖酵解通路相关性高,敲低 TRIM2 可抑制 HepG2 胞外酸化率,提高耗氧率,细胞葡萄糖吸收率[(100.000 0±2.000 0)
作者：唐津天；唐润娟；薛峰；易超；黎旺红；刘晨
来源：现代肿瘤医学 2023 年 31卷 20期
