目的 探讨四次跨膜蛋白1(Tspan1)过表达对奥沙利铂(OXA)诱导的人结直肠癌细胞系HCT116细胞凋亡的影响并分析其可能作用机制.方法 将Tspan1过表达质粒及其阴性对照空载质粒分别转染至HCT116细胞中,qRT-PCR和Western blot法检测胞中Tspan1 mRNA及其蛋白表达水平.采用14.15 μg/mL OXA或联合5 mmol/L自噬抑制剂3-MA干预转染后HCT116细胞,MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;免疫荧光检测细胞中LC-3B蛋白表达情况;Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白LC-3、Beclin1和p62蛋白表达水平.结果 Tspan1过表达可显著上调HCT116细胞中Tspan1 mRNA和蛋白表达水平,降低HCT116细胞对OXA的敏感性,抑制OXA诱导的HCT116细胞凋亡,并增强细胞中LC3B蛋白荧光强度,上调细胞中LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ比值及Beclin1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平.然而,联合3-MA处理可逆转Tspan1过表达对OXA诱导HCT116细胞凋亡的抑制作用,提高细胞对OXA的敏感性.结论 Tspan1过表达可拮抗OXA诱导的HCT116细胞凋亡,其机制可能是通过诱导细胞自噬来实现的.
作者：李孝平；周红见；高芳芳；李伟
来源：实用医学杂志 2023 年 39卷 9期
