目的:研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察 Sertoli细胞形态,采用 Western blot检测 Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体(MHC)‐Ⅱ、B7‐H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子(TGF)‐β1、IL‐17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Ser‐toli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体 Na?ve CD4+ T 细胞(CD4+ CD62 L+ CD25-)在体外混合培养时,其表面的M HC‐Ⅱ类分子和B7‐H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Na?ve CD4+ T细胞混合培养72 h后,培养上清液中的TGF‐β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[(823.10±59.07)pg/mL vs.(174.89±23.51)pg/mL ,P<0.01];流式细胞术结果显示,与同种异体Sertoli细胞共同培养的体系内,Na?ve CD4+ T 细胞(CD4+ CD62 L+CD25-)被诱导分化为CD25+ Foxp3+ Treg细胞的比例显著增加,从<1.0%增长至27.6%;
作者:陈莲一;谢林
来源:华中科技大学学报(医学版) 2014 年 6期