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目的:探究MTA1基因敲除后对鼻咽癌细胞株5-8F细胞转移能力的影响。方法设计并构建针对MTA1基因的RNAi片段,脂质体(LipofectamineTM2000)介导Si-MTA1-01(Si-MTA1-01组)和Si-MTA1-02(Si-MTA1-02组)感染5-8F细胞,同时设无义序列转染组(Si-ctr组)为对照。应用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测转染后各组细胞的MTAl mRNA和蛋白表达;细胞划痕实验、基底膜侵袭实验和细胞黏附实验检测转染后5-8F细胞迁移和侵袭能力的变化,并进行比较分析。结果与Si-ctr组相比,Si-MTA1-01和Si-MTA1-02组MTA1 mRNA及蛋白表达水平下降,穿膜细胞数减少,细胞黏附率增加(均P<0.05),划痕实验显示细胞阻滞效果明显。结论沉默MTA1能明显减弱鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力,MTA1有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点。

作者:涂英华;练祖平;谢有科

来源:天津医药 2014 年 4期

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涂英华;练祖平;谢有科
来源:
天津医药 2014 年 4期
标签:
鼻咽肿瘤 RNA干扰 细胞迁移分析 细胞黏附 细胞系,肿瘤 印迹法,蛋白质 逆转录聚合酶链反应 MTA1 鼻咽癌 5-8F细胞 nasopharyngeal neoplasms RNA interference cell migration assays cell adhesion cell line,tumor blot-ting,Western reverse transcriptase polymerase chain reaction MTA1 nasopharyngeal cancer 5-8F cell
目的:探究MTA1基因敲除后对鼻咽癌细胞株5-8F细胞转移能力的影响。方法设计并构建针对MTA1基因的RNAi片段,脂质体(LipofectamineTM2000)介导Si-MTA1-01(Si-MTA1-01组)和Si-MTA1-02(Si-MTA1-02组)感染5-8F细胞,同时设无义序列转染组(Si-ctr组)为对照。应用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测转染后各组细胞的MTAl mRNA和蛋白表达;细胞划痕实验、基底膜侵袭实验和细胞黏附实验检测转染后5-8F细胞迁移和侵袭能力的变化,并进行比较分析。结果与Si-ctr组相比,Si-MTA1-01和Si-MTA1-02组MTA1 mRNA及蛋白表达水平下降,穿膜细胞数减少,细胞黏附率增加(均P<0.05),划痕实验显示细胞阻滞效果明显。结论沉默MTA1能明显减弱鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力,MTA1有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点。

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