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目的:探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化(EMT),并分析缺氧对结直肠癌细胞侵袭、迁移的影响。方法分别选取HCT116(低度分化)和HT-29(高度分化)结直肠腺癌细胞。观察0、10、25、50、100及150 mg/L氯化钴(CoCl2)诱导2种细胞48 h后的形态变化。分析0、10、25、50及100 mg/L CoCl2处理48 h后缺氧诱导因子(HIF)-1α蛋白表达变化,筛选出CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT实验检测不同时间点(0、24、48、72及96 h)CoCl2诱导2种结直肠癌细胞的增殖情况,筛选出CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间条件下,对HCT116和HT-29细胞分别进行缺氧(缺氧组)和常氧(常氧组)处理,Transwell侵袭和划痕实验检测2组2种细胞的侵袭、迁移情况;Western blot实验和RT-PCR实验检测2组HIF-1α、E-cadherin及Vimentin的蛋白及mRNA表达水平。结果50 mg/L CoCl2作用48 h时2种细胞均出现明显的形态改变。2组HCT116、HT-29细胞的HIF-1α蛋白表达水平随CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势,50 mg/L为最适宜浓度(P<0.05)。0~96 h时2种细胞不论有无缺氧,细胞增殖能力均呈先增后减趋势(P<0.05),48 h为最佳作用时间。HCT116和HT-29细胞系中缺氧组穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组(

作者:吴丽丽;孙慧誌;孙冉;赵楠;王勇;古强;董学易;刘芳;孙保存

来源:天津医药 2016 年 44卷 5期

知识库介绍

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作者:
吴丽丽;孙慧誌;孙冉;赵楠;王勇;古强;董学易;刘芳;孙保存
来源:
天津医药 2016 年 44卷 5期
标签:
缺氧诱导因子1,α亚基 结直肠肿瘤 上皮间质转化 细胞增殖 肿瘤侵润 细胞运动 hypoxia-inducible factor1,αsubunit colorectal neoplasms epithelial-mesenchymal transition cell prolifer-ation neoplasm invasion cell movement
目的:探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化(EMT),并分析缺氧对结直肠癌细胞侵袭、迁移的影响。方法分别选取HCT116(低度分化)和HT-29(高度分化)结直肠腺癌细胞。观察0、10、25、50、100及150 mg/L氯化钴(CoCl2)诱导2种细胞48 h后的形态变化。分析0、10、25、50及100 mg/L CoCl2处理48 h后缺氧诱导因子(HIF)-1α蛋白表达变化,筛选出CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT实验检测不同时间点(0、24、48、72及96 h)CoCl2诱导2种结直肠癌细胞的增殖情况,筛选出CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间条件下,对HCT116和HT-29细胞分别进行缺氧(缺氧组)和常氧(常氧组)处理,Transwell侵袭和划痕实验检测2组2种细胞的侵袭、迁移情况;Western blot实验和RT-PCR实验检测2组HIF-1α、E-cadherin及Vimentin的蛋白及mRNA表达水平。结果50 mg/L CoCl2作用48 h时2种细胞均出现明显的形态改变。2组HCT116、HT-29细胞的HIF-1α蛋白表达水平随CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势,50 mg/L为最适宜浓度(P<0.05)。0~96 h时2种细胞不论有无缺氧,细胞增殖能力均呈先增后减趋势(P<0.05),48 h为最佳作用时间。HCT116和HT-29细胞系中缺氧组穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组(

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