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在原核表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)分子,纯化表达产物,并进行初步的生物学活性的研究中,通过提取外周血淋巴细胞总RNA进行RT-PCR克隆sTRAIL cDNA,构建sTRAIL的原核表达载体,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定,IPTG诱导表达.以发酵罐放大培养,SDS-PAGE和Western-blot确认表达,用亲和层析和阳离子层析纯化表达产物,使用L929、Qay肝癌、K562人白血病等肿瘤细胞鉴定活性.结果发现重组表达的sTRAIL融合蛋白占总蛋白的39

作者:杨芳;徐维明;刘红岩;龙海亭;肖红剑;李燕

来源:微生物学免疫学进展 2003 年 31卷 2期

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作者:
杨芳;徐维明;刘红岩;龙海亭;肖红剑;李燕
来源:
微生物学免疫学进展 2003 年 31卷 2期
标签:
TRAIL 基因克隆 原核表达 细胞凋亡
在原核表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)分子,纯化表达产物,并进行初步的生物学活性的研究中,通过提取外周血淋巴细胞总RNA进行RT-PCR克隆sTRAIL cDNA,构建sTRAIL的原核表达载体,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定,IPTG诱导表达.以发酵罐放大培养,SDS-PAGE和Western-blot确认表达,用亲和层析和阳离子层析纯化表达产物,使用L929、Qay肝癌、K562人白血病等肿瘤细胞鉴定活性.结果发现重组表达的sTRAIL融合蛋白占总蛋白的39

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