[背景]结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)休眠菌形成被认为是潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)的主要原因,但目前缺乏体内和体外模型进行机制研究.新近研究表明Mtb可感染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)并以休眠状态在细胞中长期存活.然而Mtb感染细胞模型存在周期长和生物安全要求高等问题,需要探索可用的MSC感染细胞模型用于Mtb休眠机制的研究.[目的]建立快速生长型耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord MSC,hUCMSC)的细胞模型并研究其特征.[方法]取分离好的 hUCMSC,流式细胞术鉴定其表面标志性抗原;以 Ms 菌株感染 hUCMSC,DiI 标记细胞膜,荧光显微镜下观察细胞吞噬作用;平板法计数 Ms胞内存活率;油红 O 染色观察细胞脂滴形成;鬼笔环肽荧光染色观察细胞骨架变化;实时荧光定量 PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测 Ms 感染的 hUCMSC 脂质代谢、静息和分化相关基因转录水平.[结果]Ms 感染hUCMSC后在胞内以非复制方式存活,其感染率与感染复数呈正相关;Ms感染hUCMSC可诱导脂滴合成相关基因表达,而抑制降解相关基因转录水平,从而促进细胞内脂滴形成.Ms感染促进hUCMSC 细胞骨架发生重构,RT-qPCR 检测结果显
作者:康亚莉;宁唤唤;谢燕玲;任瑞;白鹭;路延之;康健;韦垠;张琳娜;柏银兰
来源:微生物学通报 2023 年 50卷 11期