目的：通过RNA干扰抑制热休克蛋白-27（HSP27）基因的表达，探讨沉默该基因对5-氟尿嘧啶（5-FU）诱导大肠癌SW480细胞凋亡的影响及机制。方法：将细胞分为正常对照组（Normal组）、阴性siRNA转染组（NC组）、HSP27-siRNA转染组（siRNA组）、单纯5-FU组（5-FU组）、5-FU+阴性siRNA转染组（NC+5-FU组）、5-FU+HSP27-siRNA转染组（siRNA+5-FU组），通过脂质体LipofectamineTM 2000将HSP27-siRNA导入SW480细胞， CCK-8法检测靶向HSP27的siRNA和5-FU对SW480细胞增殖的抑制作用，流式细胞技术观察转染后细胞在5-FU作用下的早期凋亡情况，Western blot方法检测凋亡相关蛋白Active-casepase-3、Active-caspase-9及细胞色素C（Cytc）的表达。结果：CCK-8法检测结果显示siRNA+5-FU组细胞增殖抑制率明显高于同期siRNA组和5-FU组，表明联合应用抑制率明显升高（P＜0.05）。流式细胞仪检测结果表明siRNA组和5-FU组均可诱导SW480细胞凋亡，两者联合应用细胞早期凋亡率明显升高，与Normal组及NC组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；Western blot检测结果显示siRNA+5-FU组Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白相对表达水平均高于siRNA组和5-FU组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论：靶向HSP27-siRN

作者：黄崇杰；刘长宝；胡万乐；蔡锚

来源：温州医科大学学报 2016 年 46卷 12期