目的: 制备兔抗大鼠神经甾体合成关键酶P450侧链裂解酶(rP450side chain cleavage,rP450scc)合成肽片段的抗体, 并检测rP450scc在大鼠脑组织及神经细胞中的表达.方法: 利用多肽固相合成法(Fmoc法)合成对称的8分支16肽rP450scc多重抗原肽片段(rP450scc-16), 并以其免疫雄性新西兰兔制备抗rP450scc-16抗体.采用ELISA、 Western blot和免疫细胞化学染色法鉴定抗rP450scc-16抗体的特性.结果: 于末次免疫后5 d, 动脉放血分离血清, 用ELISA法检测抗rP450scc-16抗体的效价为1∶ 6 400.Western blot检测显示, 抗rP450scc-16抗血清与大鼠的脑、睾丸及肾上腺组织蛋白于相对分子质量为50 000处出现一条特异性的条带.用抗rP450scc-16抗体进行免疫细胞化学染色显示, 在正常大鼠的下丘脑、皮质、 海马等区及培养的胶质细胞胞质中均可见棕色颗粒.结论: 制备出高特异性的兔抗rP450scc-16抗体, 该抗体可检测rP450scc在正常大鼠脑组织中的表达和分布.
作者：江平；侯艳宁；闫彩珍
来源：细胞与分子免疫学杂志 2005 年 21卷 2期
