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目的构建小鼠白介素-10(murine interleukin-10, mIL-10)的真核表达载体,并研究其在293T细胞中的表达。方法 RT-PCR扩增小鼠脾脏IL-10基因后,克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,酶切和测序鉴定重组质粒的大小、序列。采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.0-mIL-10瞬时转染293T细胞,用Western blot法检测IL-10表达。结果重组质粒pcDNA3.0-mIL-10构建成功,而且转染了293T细胞中提取的蛋白可检测到活性蛋白。结论经酶切和测序鉴定重组质粒pcDNA3.0-mIL-10构建成功,并在293T细胞中成功表达活性蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

作者:林英豪;叶长虹;熊婧;毕丽红;黎丽旋;刘洋洋;张春忙;何继满;张亚历

来源:现代消化及介入诊疗 2013 年 3期

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作者:
林英豪;叶长虹;熊婧;毕丽红;黎丽旋;刘洋洋;张春忙;何继满;张亚历
来源:
现代消化及介入诊疗 2013 年 3期
标签:
白介素-10 pcDNA3.0 293T细胞 Interleukin-10 pcDNA3.0 293T cell
目的构建小鼠白介素-10(murine interleukin-10, mIL-10)的真核表达载体,并研究其在293T细胞中的表达。方法 RT-PCR扩增小鼠脾脏IL-10基因后,克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,酶切和测序鉴定重组质粒的大小、序列。采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.0-mIL-10瞬时转染293T细胞,用Western blot法检测IL-10表达。结果重组质粒pcDNA3.0-mIL-10构建成功,而且转染了293T细胞中提取的蛋白可检测到活性蛋白。结论经酶切和测序鉴定重组质粒pcDNA3.0-mIL-10构建成功,并在293T细胞中成功表达活性蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

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