目的:观察核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体激活对胰腺星状细胞(PSCs)增殖、迁移及细胞外基质沉积的影响。方法:对大鼠PSCs进行分离培养与鉴定，根据是否给予细菌脂多糖(LPS)10 μg/ml预处理24 h分为对照组和LPS组，ELISA法检测PSCs培养液中NLRP3炎症小体相关分子的表达；通过携带靶向NLRP3基因的shRNA慢病毒载体感染PSCs的方法构建NLRP3基因表达抑制的PSCs细胞株，根据有无LPS预处理和是否慢病毒干扰NLRP3表达，将PSCs分为LPS+阴性对照组和LPS+慢病毒组，采用CCK-8法和Transwell小室实验分别检测细胞增殖及迁移能力变化；采用免疫荧光染色检测PSCs细胞外基质α-SMA和collagen沉积；采用RT-qPCR检测PSCs促纤维化因子TGF-β的变化。结果:培养24 h的PSCs胞质内富含高亮环形脂滴，细胞表达desmin。培养7 d后，细胞体积变大，脂滴基本消失，细胞活化并表达α-SMA。LPS组PSCs上清液中caspase-1、IL-1β、IL-18水平均显著高于对照组(1.55±0.04比0.65±0.03；2.02±0.04比1.05±0.05；1.70±0.05比0.97±0.03)。慢病毒感染PSCs后，慢病毒组NLRP3蛋白表达量(0.25±0.04)显著低于阴性对照组(0.68±0.05)。对照组、LPS组、LPS+阴性对照组、LPS+慢病毒组PSCs培养48 h后的 A490值分别为0.61

作者：顾海涛；董汉光；阎九亮；亓子豪；胡倍源；武春涛；龙江

来源：中华胰腺病杂志 2023 年 23卷 2期