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目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制.方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性.结果 以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2%±4.7%.转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8%,细胞形态出现明显凋亡改变.分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mR-NA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加.结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、easpase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡.

作者:张昊;王勇;成志勇;张金金;鲁会亮;张楠

来源:医学研究杂志 2015 年 44卷 8期

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作者:
张昊;王勇;成志勇;张金金;鲁会亮;张楠
来源:
医学研究杂志 2015 年 44卷 8期
标签:
PTEN基因 MG-63细胞系 caspase家族 骨肉瘤 PTEN gene MG-63 cell line Caspase family Osteosarcoma
目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制.方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性.结果 以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2%±4.7%.转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8%,细胞形态出现明显凋亡改变.分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mR-NA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加.结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、easpase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡.

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