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目的 探讨黄芩苷对小鼠结肠癌 CT26.WT 细胞的作用及细胞死亡形式.方法 CT26.WT 细胞分为 4 组, ①正常对照组,加入新鲜培养基,常规培养; ②黄芩苷组,加入终浓度为 100 μmol·L-1 黄芩苷; ③ z-VAD-fmk 组, 加入终浓度为 20 μmol·L-1 z-VAD-fmk; ④联合用药组,加入终浓度为 20 μmol·L-1 z-VAD-fmk 1 h 后加入 100 μmol·L-1 黄芩苷.采用 CCK8 法检测黄芩苷对细胞增殖抑制作用和细胞存活率.DAPI 染色检测细胞核的变化; 透射电镜观察细胞超微结构; QPCR 法和 Western blotting 法检测黄芩苷对细胞内 RIP3 基因和蛋白表达水平的影响.结果 与正常对照组比较,黄芩苷组和联合用药组差异有统计学意义(P<0.05) ; 正常对照组细胞死亡率为(10.54±0.19) %,黄芩苷组为(34.93± 0.16) %,z-VAD 组为(11.23±0.59) %,联合用药组为(23.27±1.20) %(P<0.01) .与正常对照组比较,黄芩苷组核浓染,出现碎裂现象; 与黄芩苷组比较,联合用药组核浓染,有明显核碎裂现象.电镜结果显示黄芩苷组细胞发生坏死性凋亡,细胞肿胀,线粒体肿胀,内容物泄漏.黄芩苷组 RIP3 mRNA 的表达明显上调(P< 0.01) , RIP3 蛋白的表达明显增强(P< 0.05) .结论 黄芩苷诱导 CT26.WT 细胞发生坏死性凋亡,可使 RIP3 的基因和蛋白表达明显上调.

作者:杨爱霞;吴彪;何伟;胡必成;黄鹤归;徐蕾;张力凡

来源:医药导报 2019 年 38卷 2期

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作者:
杨爱霞;吴彪;何伟;胡必成;黄鹤归;徐蕾;张力凡
来源:
医药导报 2019 年 38卷 2期
标签:
黄芩苷 结肠癌 z-VAD-fmk RIP3 蛋白 坏死性凋亡 Baicalin Colon cancer z-VAD-fmk RIP3 protein Necroptosis
目的 探讨黄芩苷对小鼠结肠癌 CT26.WT 细胞的作用及细胞死亡形式.方法 CT26.WT 细胞分为 4 组, ①正常对照组,加入新鲜培养基,常规培养; ②黄芩苷组,加入终浓度为 100 μmol·L-1 黄芩苷; ③ z-VAD-fmk 组, 加入终浓度为 20 μmol·L-1 z-VAD-fmk; ④联合用药组,加入终浓度为 20 μmol·L-1 z-VAD-fmk 1 h 后加入 100 μmol·L-1 黄芩苷.采用 CCK8 法检测黄芩苷对细胞增殖抑制作用和细胞存活率.DAPI 染色检测细胞核的变化; 透射电镜观察细胞超微结构; QPCR 法和 Western blotting 法检测黄芩苷对细胞内 RIP3 基因和蛋白表达水平的影响.结果 与正常对照组比较,黄芩苷组和联合用药组差异有统计学意义(P<0.05) ; 正常对照组细胞死亡率为(10.54±0.19) %,黄芩苷组为(34.93± 0.16) %,z-VAD 组为(11.23±0.59) %,联合用药组为(23.27±1.20) %(P<0.01) .与正常对照组比较,黄芩苷组核浓染,出现碎裂现象; 与黄芩苷组比较,联合用药组核浓染,有明显核碎裂现象.电镜结果显示黄芩苷组细胞发生坏死性凋亡,细胞肿胀,线粒体肿胀,内容物泄漏.黄芩苷组 RIP3 mRNA 的表达明显上调(P< 0.01) , RIP3 蛋白的表达明显增强(P< 0.05) .结论 黄芩苷诱导 CT26.WT 细胞发生坏死性凋亡,可使 RIP3 的基因和蛋白表达明显上调.

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