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目的 探讨线粒体未折叠蛋白反应在无镁外液致痫海马神经元中的变化及线粒体自噬抑制剂Mdivi-1对其影响.方法 原代培养海马神经元用无镁外液诱导体外癫痫模型,并进一步采用线粒体自噬抑制剂Mdivi-1干预;采用线粒体荧光探针MitoSOX检测线粒体ROS生成、Rhodamine 123检测线粒体膜电位、采用Western blotting方法观察C/-EBP同源蛋白CHOP、线粒体内热休克蛋白HSP60、线粒体蛋白酶ClpP表达、CytC释放和caspase-3激活.结果 (1)与对照组相比,致痫组海马神经元CHOP、HSP60和ClpP表达明显增加;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显增加海马神经元CHOP、HSP60和ClpP表达;(2)与对照组相比,致痫组海马神经元线粒体ROS生成增多,并且线粒体膜电位降低;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显减少线粒体ROS生成,增加线粒体膜电位;(3)与对照组相比,致痫组海马神经元CytC释放及caspase-3激活增加;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显减少CytC释放及caspase-3激活.结论 癫痫海马神经元线粒体未折叠蛋白反应激活,而抑制线粒体自噬可通过增强线粒体未折叠蛋白反应而发挥癫痫保护作用.

作者:谢南昌;杜丽媛;连亚军;王翠;孟祥荷;李钰娟;刘凤霞

来源:中风与神经疾病杂志 2020 年 37卷 12期

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作者:
谢南昌;杜丽媛;连亚军;王翠;孟祥荷;李钰娟;刘凤霞
来源:
中风与神经疾病杂志 2020 年 37卷 12期
标签:
线粒体未折叠蛋白反应 线粒体自噬 癫痫 Mdivi-1
目的 探讨线粒体未折叠蛋白反应在无镁外液致痫海马神经元中的变化及线粒体自噬抑制剂Mdivi-1对其影响.方法 原代培养海马神经元用无镁外液诱导体外癫痫模型,并进一步采用线粒体自噬抑制剂Mdivi-1干预;采用线粒体荧光探针MitoSOX检测线粒体ROS生成、Rhodamine 123检测线粒体膜电位、采用Western blotting方法观察C/-EBP同源蛋白CHOP、线粒体内热休克蛋白HSP60、线粒体蛋白酶ClpP表达、CytC释放和caspase-3激活.结果 (1)与对照组相比,致痫组海马神经元CHOP、HSP60和ClpP表达明显增加;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显增加海马神经元CHOP、HSP60和ClpP表达;(2)与对照组相比,致痫组海马神经元线粒体ROS生成增多,并且线粒体膜电位降低;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显减少线粒体ROS生成,增加线粒体膜电位;(3)与对照组相比,致痫组海马神经元CytC释放及caspase-3激活增加;与致痫组相比,线粒体自噬抑制剂Mdivi-1可明显减少CytC释放及caspase-3激活.结论 癫痫海马神经元线粒体未折叠蛋白反应激活,而抑制线粒体自噬可通过增强线粒体未折叠蛋白反应而发挥癫痫保护作用.

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