目的:初步探究布鲁氏菌外膜蛋白16、19脂化型重组蛋白(L16、L19)对人单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)免疫调控因子表达的影响。方法:以佛波酯(PMA)活化的THP-1细胞为体外实验细胞模型,采用成组设计,分别将L16、L19与THP-1细胞共培养(L16刺激组、L19刺激组),并以PMA活化的THP-1细胞为对照组。共培养4 h时,分别采用免疫荧光染色(IFS)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测L16、L19是否进入细胞。共培养12、24 h时,实时荧光定量PCR法测定干扰素调节因子1(IRF-1)、Ⅱ类主要组织相容性复合物反式激活蛋白(CⅡTA)mRNA表达水平;Western blot法检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)和γ干扰素受体1(IFNGR1)蛋白表达水平。结果:共培养4 h时,可见L16、L19分别进入L16、L19刺激组THP-1细胞内。共培养12 h时,L16刺激组IRF-1 mRNA表达水平(0.16 ± 0.15)明显低于对照组(1.00 ± 0.00,
P < 0.05);共培养24 h时,L16刺激组CⅡTA mRNA表达水平(0.17 ± 0.10)明显低于对照组(1.00 ± 0.00,
P < 0.05);共培养12、24 h时,L19刺激组IRF-1、CⅡTA mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(均
P > 0.05)。Western blot结果显示,共培养12、24 h时,对照组
作者:杨恒;谢红珍;易嘉敏;胡飞环;任慧;王文敬
来源:中华地方病学杂志 2023 年 42卷 5期