目的:探讨解整合素金属蛋白酶12(ADAM12)基因在大骨节病患者软骨细胞损伤中的作用及其对胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)相关基因的影响。方法:由就诊于西安交通大学附属红会医院的5例大骨节病患者和5例对照受试者获得关节软骨样本,体外提取并培养关节软骨细胞。分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测大骨节病患者与对照受试者软骨细胞ADAM12 mRNA和蛋白表达水平。然后,采用慢病毒进行大骨节病患者软骨细胞ADAM12基因过表达实验,MTT法检测ADAM12基因过表达后细胞活性变化,并采用qRT-PCR检测软骨细胞分化相关基因Y染色体性别决定区-盒转录因子9(SOX9)、Ⅱ型胶原(COLⅡ),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(BAX)以及合成代谢相关基因IGFBP3、IGFBP5 mRNA表达水平。结果:大骨节病患者软骨细胞ADAM12 mRNA和蛋白表达水平(0.57 ± 0.05、0.81 ± 0.07)均显著低于对照受试者(1.00 ± 0.00、1.00 ± 0.00),差异均有统计学意义(
t = - 24.50、- 3.61,均
P < 0.05)。MTT法结果显示,ADAM12过表达组软骨细胞活性(1.09 ± 0.05)高于空载体对照组(1.00 ± 0.08),差异有统计学意义(
t = 4.12,
P = 0.031)。qRT-PCR结果显示,与空载
作者:成博伦;杨正军;常虹;郭雄;张峰;许鹏;贾雨萌
来源:中华地方病学杂志 2023 年 42卷 5期