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目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)NNT-AS1对膀胱癌细胞增殖、转移及肿瘤干细胞干性的影响和机制.方法 qRT-PCR检测lncRNA NNT-AS1在膀胱癌细胞T24、5637、UM-UC-3、TCC-SUP和膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的表达,将T24细胞和膀胱癌干细胞分为sh-NC组(转染sh-NC)、sh-NNT-AS1组(转染sh-NNT-AS1)、Control组(共转染sh-NC、inh-NC和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-NC+si-NC组(共转染sh-NNT-AS1、inh-NC和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NC组(共转染sh-NNT-AS1、miR-582-5p抑制物和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组(共转染sh-NNT-AS1、miR-582-5p抑制物和NCKAP1小干扰RNA).CCK8检测各组细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;细胞成球实验检测各组干细胞干性;流式细胞术检测CD133和CD44表达;双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA NNT-AS1与miR-582-5p及miR-582-5p与NCKAP1的靶向关系;体内成瘤实验检测lncRNA NNT-AS1对体内成瘤的影响;Western blot检测NCKAP1、YAP、TAZ、CD44、ALDH1A1、Oct4、Nanog蛋白表达.结果 lncRNA NNT-AS1高表达于T24、5637、UM-UC-3、TCC-SUP细胞.与sh-NC组比较,sh-NNT-AS1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05),膀胱癌干细胞成球数、CD44、ALDH1A1、Oct4、Nanog蛋白

作者:廖林辉;陈华平;范国斌;段钰泽

来源:局解手术学杂志 2023 年 32卷 2期

知识库介绍

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作者:
廖林辉;陈华平;范国斌;段钰泽
来源:
局解手术学杂志 2023 年 32卷 2期
标签:
膀胱癌 lncRNA NNT-AS1 增殖 转移 肿瘤干细胞干性
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)NNT-AS1对膀胱癌细胞增殖、转移及肿瘤干细胞干性的影响和机制.方法 qRT-PCR检测lncRNA NNT-AS1在膀胱癌细胞T24、5637、UM-UC-3、TCC-SUP和膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的表达,将T24细胞和膀胱癌干细胞分为sh-NC组(转染sh-NC)、sh-NNT-AS1组(转染sh-NNT-AS1)、Control组(共转染sh-NC、inh-NC和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-NC+si-NC组(共转染sh-NNT-AS1、inh-NC和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NC组(共转染sh-NNT-AS1、miR-582-5p抑制物和si-NC)、sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组(共转染sh-NNT-AS1、miR-582-5p抑制物和NCKAP1小干扰RNA).CCK8检测各组细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;细胞成球实验检测各组干细胞干性;流式细胞术检测CD133和CD44表达;双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA NNT-AS1与miR-582-5p及miR-582-5p与NCKAP1的靶向关系;体内成瘤实验检测lncRNA NNT-AS1对体内成瘤的影响;Western blot检测NCKAP1、YAP、TAZ、CD44、ALDH1A1、Oct4、Nanog蛋白表达.结果 lncRNA NNT-AS1高表达于T24、5637、UM-UC-3、TCC-SUP细胞.与sh-NC组比较,sh-NNT-AS1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05),膀胱癌干细胞成球数、CD44、ALDH1A1、Oct4、Nanog蛋白

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