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目的 研究HDV核酶在细胞内对乙型肝炎病毒(HBV)复制及其抗原表达的抑制作用.方法 1)以HBV前基因组mRNA为靶基因,体外筛选出HDV核酶有效作用位点,构建HDV核酶并进行体外测活;2)分别选用tRNA-Val、U6和hCMV 3种真核启动子,重组构建HDV核酶真核表达载体ptVHRz、pSURz和pcDHRz,分别用3种载体转染HepG2.2.15细胞;3)用点杂交、ELISA和实时荧光定量PCR方法分别检测核酶在细胞内的表达及对HBV的抑制作用.结果 在HBVC基因区筛选到一位点,所构建的HDV核酶在体外条件下对该位点能产生有效切割.3种核酶表达载体在细胞内均能高效表达,在转染48 h后,ptVHRz和pcDHRz对HBeAg的表达产生了明显的抑制作用,而对HBsAg没有抑制作用.三者对HBV的复制均未产生明显影响.结论 HDV核酶在细胞内对HBV抗原的表达能产生特异性抑制作用,但未能有效抑制HBV的复制,对其原因需进一步深入研究.
作者：孟斌；潘光锦；刘毅；鲁艳琴；韩金祥；温博贵
来源：中国病原生物学杂志 2007 年 2卷 6期
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