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目的:观察腺病毒载体介导的抑癌基因LRIG1对前列腺癌细胞(PC-3细胞)增殖力、凋亡等生物学特性的影响。方法从前列腺增生组织获取目的基因LRIG1并将其与腺病毒骨架质粒pAd/PL-DEST包装,获取正确的重组腺病毒质粒pAD-LRIG1并扩增后,提取得到高滴度pAD-LRIG1(1×108PFU/mL)。将 pAD-LRIG1按感染复数(MOI)=10加入PC-3细胞中,并设置空白对照,培养48h后,收集细胞并采用RT-PCR和Western Blot检测PC-3细胞中LRIG1的表达;将pAD-LRIG1按MOI=0、5、20(分别为对照组、低组、高组)分别加入PC-3细胞中,培养48h后,采用BrdU法检测细胞的增殖率,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果通过RT-PCR和Western Blot检测,在PC-3细胞中加入pAD-LRIG1,能使LRIG1在核酸和蛋白水平表达;通过BrdU检测,对照组、低组、高组的细胞增殖率分别为(58.6±5.2)

作者:张朝晖;杨安卿;黄滔;楚晨龙;赵晨晖;马斌斌;周文龙

来源:中国男科学杂志 2016 年 30卷 9期

知识库介绍

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作者:
张朝晖;杨安卿;黄滔;楚晨龙;赵晨晖;马斌斌;周文龙
来源:
中国男科学杂志 2016 年 30卷 9期
标签:
基因,肿瘤抑制 前列腺肿瘤 细胞系,肿瘤 腺病毒载体 人 genes,tumor suppresso prostatic neoplasms cell line,tumor adenovirus vector human
目的:观察腺病毒载体介导的抑癌基因LRIG1对前列腺癌细胞(PC-3细胞)增殖力、凋亡等生物学特性的影响。方法从前列腺增生组织获取目的基因LRIG1并将其与腺病毒骨架质粒pAd/PL-DEST包装,获取正确的重组腺病毒质粒pAD-LRIG1并扩增后,提取得到高滴度pAD-LRIG1(1×108PFU/mL)。将 pAD-LRIG1按感染复数(MOI)=10加入PC-3细胞中,并设置空白对照,培养48h后,收集细胞并采用RT-PCR和Western Blot检测PC-3细胞中LRIG1的表达;将pAD-LRIG1按MOI=0、5、20(分别为对照组、低组、高组)分别加入PC-3细胞中,培养48h后,采用BrdU法检测细胞的增殖率,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果通过RT-PCR和Western Blot检测,在PC-3细胞中加入pAD-LRIG1,能使LRIG1在核酸和蛋白水平表达;通过BrdU检测,对照组、低组、高组的细胞增殖率分别为(58.6±5.2)

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