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目的:探讨重组人红细胞生成素( rhEPO)对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞( HK-2细胞)转分化过程中炎性因子的变化及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,采用随机数字表法分为空白对照组(未加任何刺激物)、高糖诱导组(高糖终浓度为30 mmol/L)、甘露醇对照组(甘露醇为24.5 mmol/L)、rhEPO对照组( rhEPO终浓度为20 U/ml )、不同浓度 rhEPO 干预组( rhEPO 终浓度分别为5、10、20 U/ml +高糖)及 Rho 激酶抑制剂(Y27632)组(Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y2763230 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L),以上各组均培养24 h。采用RT-PCR检测各组细胞RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平;采用细胞免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测人纤维连接蛋白(FN)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达水平。结果各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达比较,差异均有统计学意义( P<0.05);其中高糖诱导组与5 U/ml rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均高于空白对照组,10 U/ml rhEPO组、20 U/ml rhEPO组及Rho激酶抑制剂组RhoA、ROCK1 mRNA表达均低于空白对照组(P<0.05);不同浓度rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA

作者:陈艳霞;杨丽萍;吴险峰;秦晓华;黄翀;房向东;涂卫平

来源:中国全科医学 2015 年 20期

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知识库介绍

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作者:
陈艳霞;杨丽萍;吴险峰;秦晓华;黄翀;房向东;涂卫平
来源:
中国全科医学 2015 年 20期
标签:
糖尿病肾病 红细胞生成素 细胞转分化 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α RhoA/ROCK信号通路 Diabetic nephropathies Erythropoietin Cell transdifferentiation Interleukin - 6 Tumor necrosis factor-alpha RhoA/ROCK signaling pathway
目的:探讨重组人红细胞生成素( rhEPO)对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞( HK-2细胞)转分化过程中炎性因子的变化及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,采用随机数字表法分为空白对照组(未加任何刺激物)、高糖诱导组(高糖终浓度为30 mmol/L)、甘露醇对照组(甘露醇为24.5 mmol/L)、rhEPO对照组( rhEPO终浓度为20 U/ml )、不同浓度 rhEPO 干预组( rhEPO 终浓度分别为5、10、20 U/ml +高糖)及 Rho 激酶抑制剂(Y27632)组(Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y2763230 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L),以上各组均培养24 h。采用RT-PCR检测各组细胞RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达水平;采用细胞免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测人纤维连接蛋白(FN)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达水平。结果各组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达比较,差异均有统计学意义( P<0.05);其中高糖诱导组与5 U/ml rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表达均高于空白对照组,10 U/ml rhEPO组、20 U/ml rhEPO组及Rho激酶抑制剂组RhoA、ROCK1 mRNA表达均低于空白对照组(P<0.05);不同浓度rhEPO组RhoA mRNA、ROCK1 mRNA

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