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目的构建结核分枝杆菌早期分泌蛋白Ag85B和MPT64融合基因(AM)及其原核表达质粒并进行表达.方法采用gene SOEing法将 ag85b和mpt64用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser)3融合,经限制性内切酶切后克隆入原核表达载体pET32a中,进行酶切、PCR鉴定和DNA序列测定.将重组质粒转染Ecoli.BL21,经过IPTG诱导后其表达产物进行SDS-PAGE和免疫印迹分析.结果 AM融合基因定向克隆入pET32a中,双向测序验证碱基突变率为0.11

作者:骆旭东;朱道银;陈全;蒋英;江山

来源:中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 3期

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作者:
骆旭东;朱道银;陈全;蒋英;江山
来源:
中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 3期
标签:
结核分枝杆菌 Ag85B MPT64 融合蛋白
目的构建结核分枝杆菌早期分泌蛋白Ag85B和MPT64融合基因(AM)及其原核表达质粒并进行表达.方法采用gene SOEing法将 ag85b和mpt64用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser)3融合,经限制性内切酶切后克隆入原核表达载体pET32a中,进行酶切、PCR鉴定和DNA序列测定.将重组质粒转染Ecoli.BL21,经过IPTG诱导后其表达产物进行SDS-PAGE和免疫印迹分析.结果 AM融合基因定向克隆入pET32a中,双向测序验证碱基突变率为0.11

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