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目的 优化pUC118-ski/DH5α工程菌的发酵工艺.方法 筛选高拷贝质粒工程菌,通过优化培养基组分、发酵温度、补料成分和补料方式及培养时间,确定最佳发酵参数；以最佳发酵参数在50 L发酵罐中连续发酵3批,验证优化的发酵工艺的重复性.结果 最佳发酵参数为:以甘油为碳源的培养基,发酵温度25℃,以50％Glycerol梯度恒速流加方式补料,培养时间为12 h；以最佳发酵参数在50 L发酵罐中连续发酵3批工程菌,菌体湿重和质粒含量分别达52.7～60.3 g/L和1.79～1.95 mg/g湿菌,质粒拷贝数为1012 copies/μl,超螺旋质粒的比例达90％以上.结论 优化了pUC 118-ski/DH5α工程菌的发酵工艺,为重组质粒的规模化生产及下游纯化奠定了基础.
作者：彭艳；李平；刘苹；周元国
来源：中国生物制品学杂志 2012 年 25卷 4期
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