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目的 分析冻干人用狂犬病疫苗(Veto细胞)蛋白的结构特性.方法 SDS-PAGE电泳分离4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液,电泳条带经nanoLC-MS/MS进行蛋白鉴定,Native-PAGE分析病毒颗粒的完整性,并分析蛋白相对分子质量.同时进行N-末端氨基酸序列分析.结果 SDS-PAGE分析可见5个主条带,分别为狂犬病毒G、M、N、P蛋白及G蛋白二聚体(G-1),经nanoLC-MS/MS鉴定,确定相对分子质量分别为74 000、21 885、57 287、40 934及141 067,各结构蛋白均包含在病毒颗粒中,M、N、P、G蛋白的N-末端起始氨基酸序列为分别为MNFLR、MDADR、MSKIF、MVPQA,与预期一致.结论 4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液所含结构蛋白源于狂犬病病毒.

作者:匡志新;柴博雅;李春艳;孙宏亮;朱美宣;熊晋峰;谢冰丽;王帆;解辉;邹勇

来源:中国生物制品学杂志 2019 年 32卷 4期

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匡志新;柴博雅;李春艳;孙宏亮;朱美宣;熊晋峰;谢冰丽;王帆;解辉;邹勇
来源:
中国生物制品学杂志 2019 年 32卷 4期
标签:
狂犬病疫苗 结构蛋白 SDS-PAGE分析 nanoLC-MS/MS 氨基酸序列分析 Vero细胞
目的 分析冻干人用狂犬病疫苗(Veto细胞)蛋白的结构特性.方法 SDS-PAGE电泳分离4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液,电泳条带经nanoLC-MS/MS进行蛋白鉴定,Native-PAGE分析病毒颗粒的完整性,并分析蛋白相对分子质量.同时进行N-末端氨基酸序列分析.结果 SDS-PAGE分析可见5个主条带,分别为狂犬病毒G、M、N、P蛋白及G蛋白二聚体(G-1),经nanoLC-MS/MS鉴定,确定相对分子质量分别为74 000、21 885、57 287、40 934及141 067,各结构蛋白均包含在病毒颗粒中,M、N、P、G蛋白的N-末端起始氨基酸序列为分别为MNFLR、MDADR、MSKIF、MVPQA,与预期一致.结论 4批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液所含结构蛋白源于狂犬病病毒.

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