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目的 利用随机噬菌体12肽库筛选出血型D抗原的模拟多肽并验证.方法 采用IgG型单克隆抗-D筛选噬菌体随机12肽库,测定每轮筛选后洗脱物与抗-RhD的结合情况.对经特异性筛选得到的阳性噬菌体克隆进行DNA序列测定,将推导出的12肽氨基酸序列进行同源性比较,通过凝集抑制试验验证阳性噬菌体与IgG型单克隆抗-D的反应.结果 随着筛选轮次增加,噬菌体洗脱物与抗-RhD的结合力逐渐增强.经过4轮淘洗后,得到8个亲和力较强且具有较高重合率的保守区域的12肽序列.凝集抑制实验表明具有相同氨基酸序列的阳性噬菌体对IgG型单克隆抗-D与RhD阳性红细胞的凝集反应具有抑制作用.结论 随机噬菌体12肽库筛选得到的血型D抗原模拟多肽,为RhD结构与功能研究及研制针对RhD新生儿溶血病的新型诊断抗原、制备特异疫苗以及探索新的治疗方法提供实验基础.

作者:吴凡;庄乃保;张印则;苏宇清;梁延连

来源:中国输血杂志 2017 年 30卷 10期

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作者:
吴凡;庄乃保;张印则;苏宇清;梁延连
来源:
中国输血杂志 2017 年 30卷 10期
标签:
肽库 RhD抗原 细菌噬菌体 表位 peptide library RhD antigen bacteriophages epitope
目的 利用随机噬菌体12肽库筛选出血型D抗原的模拟多肽并验证.方法 采用IgG型单克隆抗-D筛选噬菌体随机12肽库,测定每轮筛选后洗脱物与抗-RhD的结合情况.对经特异性筛选得到的阳性噬菌体克隆进行DNA序列测定,将推导出的12肽氨基酸序列进行同源性比较,通过凝集抑制试验验证阳性噬菌体与IgG型单克隆抗-D的反应.结果 随着筛选轮次增加,噬菌体洗脱物与抗-RhD的结合力逐渐增强.经过4轮淘洗后,得到8个亲和力较强且具有较高重合率的保守区域的12肽序列.凝集抑制实验表明具有相同氨基酸序列的阳性噬菌体对IgG型单克隆抗-D与RhD阳性红细胞的凝集反应具有抑制作用.结论 随机噬菌体12肽库筛选得到的血型D抗原模拟多肽,为RhD结构与功能研究及研制针对RhD新生儿溶血病的新型诊断抗原、制备特异疫苗以及探索新的治疗方法提供实验基础.

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