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目的对以包涵体形式表达的 TRAIL 和 EGFR 配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL 的制备过程进行优化。<br>  方法对大肠杆菌原核表达 Ec-LDP-TRAIL 目的蛋白的温度、诱导物浓度、起始菌体密度及时间等条件进行优化;在Ni2+亲和层析纯化蛋白过程中对样品预处理以及纯化缓冲液成分进行优化;对纯化后蛋白的分步透析复性过程进行一系列优化,并通过基于 ELISA 的结合活性实验分析Ec-LDP-TRAIL 与肿瘤细胞的结合能力。<br>  结果经过工艺优化后,纯化后的融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL纯度达95

作者:朱大强;陈淑珍

来源:中国医药生物技术 2014 年 2期

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作者:
朱大强;陈淑珍
来源:
中国医药生物技术 2014 年 2期
标签:
包涵体 重组融合蛋白质类 蛋白质复性 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 Inclusion bodies Recombinant fusion proteins Protein renaturation TNF-related apoptosis-inducing ligand
目的对以包涵体形式表达的 TRAIL 和 EGFR 配体寡肽与力达霉素辅基蛋白融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL 的制备过程进行优化。<br>  方法对大肠杆菌原核表达 Ec-LDP-TRAIL 目的蛋白的温度、诱导物浓度、起始菌体密度及时间等条件进行优化;在Ni2+亲和层析纯化蛋白过程中对样品预处理以及纯化缓冲液成分进行优化;对纯化后蛋白的分步透析复性过程进行一系列优化,并通过基于 ELISA 的结合活性实验分析Ec-LDP-TRAIL 与肿瘤细胞的结合能力。<br>  结果经过工艺优化后,纯化后的融合蛋白 Ec-LDP-TRAIL纯度达95

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