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目的:探究田蓟苷(tilianin,Til)预处理对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞的保护作用.方法:体外培养H9c2心肌细胞,将其分为正常(Normal)组、模型(H/R)组、田蓟苷(Til)组、p53激动剂(Nutlin-3a)组、田蓟苷+p53激动剂(Til+Nutlin-3a)组,缺氧12 h再复氧6 h,建立H/R模型.CCK-8法测H9c2细胞活力,化学荧光法测ROS水平,试剂盒测LDH、MDA、SOD水平,JC-1法测线粒体膜电位(△Ψm),Annexin-FITC/PI和Fluo-3 AM分别结合流式细胞仪检测细胞凋亡率和Ca2+荧光强度,RT-PCR 测定 p53、NOX4、Bax、Bcl-2 mRNA 表达,免疫蛋白印迹法检测 p53、NOX4、Bax、Bcl-2、Nrf2、HO-1 蛋白表达,免疫荧光法测定p53、NOX4蛋白表达.结果:相较于H/R组,Til组H9c2细胞活力增强(P<0.01),ROS、LDH、MDA水平下降(P<0.01),SOD水平上升(P<0.01),△Ψm 增强(P<0.01),早期和晚期凋亡细胞降低(P<0.01),Ca2+荧光强度减弱(P<0.01),p53、NOX4、Bax的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),Bcl-2的mRNA和蛋白表达上升(P<0.01),Nrf2、HO-1的蛋白表达进一步上升(P<0.01),p53、NOX4阳性细胞表达减少;单独应用Nutlin-3a后上述效应被削弱,而当加入Til后又不同程度逆转Nutlin-3a的效应.结论:Til对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤具有显著的保护作用,该

作者:袁勇;李雅琪;黄川生;赵云丽;曹文疆;王新春

来源:中国医院药学杂志 2023 年 43卷 24期

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作者:
袁勇;李雅琪;黄川生;赵云丽;曹文疆;王新春
来源:
中国医院药学杂志 2023 年 43卷 24期
标签:
田蓟苷 H9c2心肌细胞 缺氧/复氧 p53/NOX4通路 氧化应激 凋亡 tilianin H9c2 cardiomyocyte hypoxia/reoxygenation p53/NOX4 pathway oxidative stress apoptosis
目的:探究田蓟苷(tilianin,Til)预处理对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞的保护作用.方法:体外培养H9c2心肌细胞,将其分为正常(Normal)组、模型(H/R)组、田蓟苷(Til)组、p53激动剂(Nutlin-3a)组、田蓟苷+p53激动剂(Til+Nutlin-3a)组,缺氧12 h再复氧6 h,建立H/R模型.CCK-8法测H9c2细胞活力,化学荧光法测ROS水平,试剂盒测LDH、MDA、SOD水平,JC-1法测线粒体膜电位(△Ψm),Annexin-FITC/PI和Fluo-3 AM分别结合流式细胞仪检测细胞凋亡率和Ca2+荧光强度,RT-PCR 测定 p53、NOX4、Bax、Bcl-2 mRNA 表达,免疫蛋白印迹法检测 p53、NOX4、Bax、Bcl-2、Nrf2、HO-1 蛋白表达,免疫荧光法测定p53、NOX4蛋白表达.结果:相较于H/R组,Til组H9c2细胞活力增强(P<0.01),ROS、LDH、MDA水平下降(P<0.01),SOD水平上升(P<0.01),△Ψm 增强(P<0.01),早期和晚期凋亡细胞降低(P<0.01),Ca2+荧光强度减弱(P<0.01),p53、NOX4、Bax的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),Bcl-2的mRNA和蛋白表达上升(P<0.01),Nrf2、HO-1的蛋白表达进一步上升(P<0.01),p53、NOX4阳性细胞表达减少;单独应用Nutlin-3a后上述效应被削弱,而当加入Til后又不同程度逆转Nutlin-3a的效应.结论:Til对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤具有显著的保护作用,该

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