目的：：通过观察雷公藤甲素对氨基核苷嘌呤霉素( puromycin amino nucleotide,PAN)损伤足细胞的mTOR通路及自噬水平的影响,探讨雷公藤甲素(triptolide,TP)对mTOR-自噬通路的影响及其保护足细胞的可能机制。方法：体外培养的小鼠足细胞系(MPC5)为研究对象,PAN分别不同时间(0 h、1 h、3 h、4 h、6 h、24 h)刺激小鼠足细胞,检测p-mTOR、Beclin1、synaptopodin表达含量的变化,成功构建PAN致足细胞损伤模型。后将足细胞随机分为以下4组：(1)对照组( Con组)；(2)PAN组(PAN组,PNA 50μg/ml)；(3)雷帕霉素(rapamycin,Rap)组(Rap组,PNA 50μg/ml+RAP 200 ng/ml)；(4) PAN+TP组( TP组,PNA 50μg/ml+TP 10 ng/ml)。各组培养时间均为4 h；采用western blot检测足细胞p-mTOR、p-Akt、p-ULK1、LC3、Beclin-1、Synaptopodin蛋白表达量。结果：PAN处理不同的时间梯度,与Con组相比,PAN处理4 h后,诱导p-mTOR的表达、减少Beclin1、synaptopodin表达(P<0.05),成功建立PAN作用致体外足细胞损伤模型。与PAN组比较,雷公藤甲素可使p-mTOR、p-ULK1及p-Akt的表达明显上调(P<0.05),而LC3、Beclin1及Synaptopodin的表达明显下降(P<0.05)。结论：实验表明足细胞损伤可能与足细胞内自噬水平的变化有关,PAN刺激可能呈时间依赖性通过mTOR

作者：刘丽秋；王珂；韩润鸿；宋起

来源：中国中西医结合肾病杂志 2015 年 12期