探讨白果内酯(BB)通过抑制巨噬细胞/小胶质细胞炎症反应、促进神经营养因子分泌、干预外周免疫中CD4+T细胞活化分化,从而发挥神经保护作用及其机制.以质量浓度梯度为12.5、25、50、100μg·mL-1的BB干预RAW264.7与BV2细胞,采用MTT、CCK-8法检测BB的细胞毒性并选取合适的药物浓度进行后续实验.分别以脂多糖(LPS)诱导RAW264.7、BV2细胞、小鼠骨髓巨噬细胞、原代小胶质细胞建立炎性模型,并使用ELISA法检测BB对细胞增殖、炎性因子和神经营养因子分泌的影响.选取7~8周龄C57BL/6雌性小鼠分离脾脏单核细胞,无菌条件下磁珠分选CD4+T细胞,用骨髓巨噬细胞模型中的条件培养基与CD3/CD28诱导分化Th17细胞,ELISA法检测上清中IL-17细胞因子含量,以测定对CD4+T细胞活化分化程度的影响.另将骨髓巨噬细胞与原代小胶质细胞模型中的条件培养基,孵育PC12细胞,观察细胞数量和形态,并用LDH法测定细胞毒性,结果显示BB在12.5~100μg·mL-1对RAW264.7与BV2细胞无细胞毒性,对低炎症模型细胞的活性亦无明显影响.选取BB 50μg·mL-1进行实验,结果显示BB可抑制LPS诱导的炎症细胞模型中炎性因子的分泌.使用条件培养基进行干预的CD4+T细胞模型实验,结果显示LPS诱导的骨髓巨噬细胞炎症模型条件培养基能够促进CD4+T细胞的活化分化,而进行
作者:陈阳阳;鞠文媛;褚果果;李晓慧;魏汝恒;王青;肖保国;马存根
来源:中国中药杂志 2023 年 48卷 15期