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用聚乙二醇(PEG)沉淀循环免疫复合物(CIC),然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝胶柱(SBA)进一步纯化CIC,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)及免疫印迹法(western blot)检测CIC中流行性出血热(EHF)病毒的特异多肽成分。此外,纯化的CIC应用多聚酶链反应(PCR)方法从分子生物学角度证实其特异性。PCR产物作琼脂凝胶电泳、southern blot后,采用DNA杂交自显影法证实其DNA区带,以此,从EHF患者CIC中直接检测EHF病毒。用上述方法测定28例EHF患者各期标本共76份。其中54份测得特异性免疫复合物,即发热期23/27,移行期(包括休克、少尿期)18/24、多尿期9/17及恢复期4/8。上述结果发现CIC中病毒量较病毒阳性对照明显增多。且EHF患者早期即形成CIC,故血液中大部份病毒以免疫复合物形式存在。

作者:杨佩珍;陈国芬;孙涛;王嘉瑞

来源: 1991 年 09卷 4期

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作者:
杨佩珍;陈国芬;孙涛;王嘉瑞
来源:
1991 年 09卷 4期
标签:
流行性出血热 循环免疫复合物 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹法 多聚酶链反应
用聚乙二醇(PEG)沉淀循环免疫复合物(CIC),然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝胶柱(SBA)进一步纯化CIC,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)及免疫印迹法(western blot)检测CIC中流行性出血热(EHF)病毒的特异多肽成分。此外,纯化的CIC应用多聚酶链反应(PCR)方法从分子生物学角度证实其特异性。PCR产物作琼脂凝胶电泳、southern blot后,采用DNA杂交自显影法证实其DNA区带,以此,从EHF患者CIC中直接检测EHF病毒。用上述方法测定28例EHF患者各期标本共76份。其中54份测得特异性免疫复合物,即发热期23/27,移行期(包括休克、少尿期)18/24、多尿期9/17及恢复期4/8。上述结果发现CIC中病毒量较病毒阳性对照明显增多。且EHF患者早期即形成CIC,故血液中大部份病毒以免疫复合物形式存在。

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