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用聚乙二醇(PEG)沉淀流行性出血热(EHF)病人血清循环免疫复合物(CIC),然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝脱柱(SBA)进一步纯化CIC,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹法(Western blot)检测CIC中EHF病毒的特异性多肽成分。此外,对纯化的CIC应用聚合酶链反应(PCR)方法从分子水平证实其特异性。将PCR产物作DNA琼脂凝胶电泳,从DNA区带位置证实其为EHF病毒特异性DNA.然后作Southern blot,采用DNA杂交自显影法进一步证实特异性。应用上述方法首先从人工合成复合物经纯化后,检测病毒抗原。继之,从76份EHF病人血标本纯化CIC后,直接从CIC中检测EHF病毒抗原。

作者:杨佩珍;陈国芬;王嘉瑞

来源: 1993 年 07卷 2期

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作者:
杨佩珍;陈国芬;王嘉瑞
来源:
1993 年 07卷 2期
标签:
聚合酶链式反应 免疫印迹法 循环免疫复合物 流行性出血热
用聚乙二醇(PEG)沉淀流行性出血热(EHF)病人血清循环免疫复合物(CIC),然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝脱柱(SBA)进一步纯化CIC,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹法(Western blot)检测CIC中EHF病毒的特异性多肽成分。此外,对纯化的CIC应用聚合酶链反应(PCR)方法从分子水平证实其特异性。将PCR产物作DNA琼脂凝胶电泳,从DNA区带位置证实其为EHF病毒特异性DNA.然后作Southern blot,采用DNA杂交自显影法进一步证实特异性。应用上述方法首先从人工合成复合物经纯化后,检测病毒抗原。继之,从76份EHF病人血标本纯化CIC后,直接从CIC中检测EHF病毒抗原。

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