目的 阐明促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,EphA2)蛋白可经p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)信号通路调控头颈部鳞状细胞癌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达.方法 采用脂质体2000将EphA2蛋白过表达载体pEGFP-N1-EphA2和空白载体pEGFP-N1分别转染头颈鳞状细胞癌Tu686细胞,酶联免疫吸附法检测EphA2蛋白上调后VEGF蛋白的表达,Western blot法检测p38 MAPK信号通路有无激活;进一步利用不同浓度(0、5、10 μmol/L)小分子抑制剂SB203580特异性阻断p38MAPK通路,酶联免疫吸附法检测VEGF蛋白的表达改变有无逆转.结果 Tu686细胞EphA2蛋白上调后,VEGF蛋白在空白载体组和亲本细胞组中的表达(x±s)分别为(400.99±33.50) pg/ml和(385.30±33.50) pg/ml,而在实验组中的表达显著升高为(535.31±45.71) pg/ml,差异有统计学意义(F=17.091,P<0.01);同时,实验组Tu686细胞磷酸化p38 MAPK的表达上调.不同浓度(0、5、10 μmol/L) SB203580作用EphA2蛋白过表达的Tu686细胞后,磷酸化p38 MAPK的表达则被梯度抑制,且VEGF蛋白的表达逐渐降低,分别为(643.75±52.00) pg/ml、(513.52±54.05) pg/ml、(302.85±13.93) pg/ml,三组间差异有统
作者:刘勇;谭浩蕾;李果;余长云;粟忠武;任舒灵;朱刚才;邱元正;田勇泉
来源:中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013 年 48卷 3期