目的 运用RNA干扰(RNAi)技术研究Olf-1/EBF相关锌指蛋白(OAZ)对其信号通路相关基因的干预作用及对狼疮抗核抗体(ANA)产生的影响.方法 采集并分离系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞,分为实验组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组进行细胞培养.实验组和阳性对照组分别用OAZ和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)小干扰RNA(siRNA)在体外对培养细胞进行干扰,阴性对照组采用无关RNA序列,空白对照组为培养基对照.72 h后分离细胞和上清液,从细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析不同分组OAZ信号通路相关基因OAZ、分化抑制因子(Id)1、Id2、Id3、Id4 mRNA表达水平的变化.酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定上清液中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-12、IL-21、CC趋化因子配体(CCL)2、抗核抗体(ANA)浓度,并分析这些因子分泌水平与OAZ基因表达的相关性.结果 实验组OAZ、Id1、Id2、Id3基因的mRNA表达水平(△Ct分别为12.5±1.4、8.9±1.5、4.3±0.8、8.0±1.1)较阴性对照组(△Ct分别为10.2±1.1、6.5±1.2、2.4±1.3、6.2±1.2)显著降低(P<0.05);Id4表达水平虽较阴性对照组有低表达趋势,但差异无统计学意义.实验组IFN-γ、IL-10、IL-12、IL-21、ANA的水平明显低于阴性对照组;而

作者：李荣良；黄静；周涛；孙凌云；冯学兵

来源：中华风湿病学杂志 2010 年 14卷 1期