目的 探讨特异性miRNA抑制核因子-κB (NF-κB)转录对肝癌多药耐药(MDR)的逆转效果. 方法 分析肝癌细胞及其耐药株(HepG2/ADM)和肝细胞(L02)中P-糖蛋白(P-gp)、NF-κB的表达;构建与筛选特异性NF-κ B miRNA质粒,并转染肝癌细胞HepG2和HepG2/ADM,以Western blot测定P-gp及NF-κB浓度,以荧光定量聚合酶链反应检测其基因表达;以细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况及药物对细胞增殖的影响;以流式细胞术、Annexin-V-PE/7-ADD双染法观察细胞周期与凋亡情况.两组均数比较采用t检验,多组间均数比较采用方差分析. 结果 肝癌细胞经阿霉素处理后P-gp表达及NF-κ B磷酸化水平增高.在24、48 h和72 h时,HepG2/ADM细胞耐药指数(IC50=4.166,1.522,1.380,单位μ mol/L),分别是HepG2细胞(IC50=0.489,0.221,0.224,单位μ mol/L)的8.519,6.874和6.166倍.HepG2/ADM细胞mdr1 mRNA和NF-κ B mRNA的相对表达水平(△ct值)为3.310±0.154和2.580±0.040,明显高于HepG2细胞的0.084±0.038和0.607±0.032(P值均＜0.01).特异性miRNA1转染HepG2/ADM细胞后,mdr1 mRNA(2-△△cl)为0.326±0.011,显著低于阴性组的0.804±0.057(t=14.262,P＜0.01),伴胞内总NF-κB 1p65、胞核NF-κB磷酸化p65和P-gp表达水平明显下降(P＜0.01),癌细胞增殖抑制、

作者：王理；蔡胤；时运；姚敏；潘刘翃；顾娟娟；杨绪莉；吴玮；姚登福

来源：中华肝脏病杂志 2016 年 24卷 7期