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目的 探讨早老素(PSI)蛋白突变体在阿尔茨海默病(AD)发生中的作用和PSI蛋白的正常生理功能及分子伴侣蛋白热休克蛋白70同源蛋白羧基端相互作用蛋白(CHIP)的相互作用.方法 采用酵母双杂交系统筛选与PSI蛋白相互作用的蛋白.在构建pGBKT7-PS1-C203诱饵质粒和含全长CHIP的pACT2一CHIP质粒表达载体后,用p-半乳糖苷酶活性测定法检测两者的相互作用;然后转染哺乳动物细胞293T,用Co-IP和Western blot法测试其相瓦作用. 结果 获得了一个能与PSI蛋白相互作用的蛋白,即CHIP,并通过β-半乳糖甘酶活性测试、免疫共沉淀进一步证实了PSI和CHIP相互作用的特异性. 结论 CHIP既可以和分子伴侣蛋白相互作用,本身又具有泛素连接酶活性,可调控蛋白的折叠和降解,PSI与CHIP相互作用的证实,有助于阐明机体泛素-蛋白酶体系统对PSI的调控和进一步阐明AD的病理机制.
作者：刘润忠；易雪莲；霍淑芳；扬悦；侯海波；张云武；洪水根；许华曦
来源：中华老年医学杂志 2008 年 27卷 10期
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