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目的 探讨晚期糖基化终末产物(AEGs)对内皮细胞衰老以及内皮屏障功能的影响和作用机制. 方法 体外分离和培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为3组,分别为空白对照组(无干预)、牛血清白蛋白(BSA)对照组(BSA干预72 h)、AGEs组(AGEs干预72 h),分别进行β行半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组衰老相关基因p53、p21、p16的表达;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐法(DCFH-DA)测定细胞内活性氧;细胞电阻计测量各组的跨内皮细胞电阻(TER);蛋白免疫印迹法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和肌球蛋白轻链(MLC)的表达. 结果 与空白对照组(7.81±0.35)%、BSA对照组(7.64±0.91)%相比,AGEs干预HUVECs引起SA-ECs轻链染色阳性率明显增加(67.30±0.75)%(P<0.01),以及衰老相关基因p53、p21、p16的表达量增加(P<0.05).空白对照组(48.0±6.3)Ω·cm2与BSA对照组(42.0±7.8)Ω·cm2 TER比较差异无统计学意义(P>0.05),而AEGs组TER(27.0±4.2)Ω·cm2降低,与空白对照组和BSA对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).空白对照组(38.36±8.55)%与BSA对照组(41.67±6.93)%活性氧生成比较差异无统计学意义(P>0.05),而AEGs组(69.31±8.47)%活

作者:程冕;严金华;阮磊;翟茂才;黄毅;张乐;张存泰

来源:中华老年医学杂志 2019 年 38卷 4期

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作者:
程冕;严金华;阮磊;翟茂才;黄毅;张乐;张存泰
来源:
中华老年医学杂志 2019 年 38卷 4期
标签:
糖基化终末产物,高级 内皮细胞 衰老 Glycosylation end products,advanced Endothelial cell Aging
目的 探讨晚期糖基化终末产物(AEGs)对内皮细胞衰老以及内皮屏障功能的影响和作用机制. 方法 体外分离和培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为3组,分别为空白对照组(无干预)、牛血清白蛋白(BSA)对照组(BSA干预72 h)、AGEs组(AGEs干预72 h),分别进行β行半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组衰老相关基因p53、p21、p16的表达;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐法(DCFH-DA)测定细胞内活性氧;细胞电阻计测量各组的跨内皮细胞电阻(TER);蛋白免疫印迹法检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和肌球蛋白轻链(MLC)的表达. 结果 与空白对照组(7.81±0.35)%、BSA对照组(7.64±0.91)%相比,AGEs干预HUVECs引起SA-ECs轻链染色阳性率明显增加(67.30±0.75)%(P<0.01),以及衰老相关基因p53、p21、p16的表达量增加(P<0.05).空白对照组(48.0±6.3)Ω·cm2与BSA对照组(42.0±7.8)Ω·cm2 TER比较差异无统计学意义(P>0.05),而AEGs组TER(27.0±4.2)Ω·cm2降低,与空白对照组和BSA对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).空白对照组(38.36±8.55)%与BSA对照组(41.67±6.93)%活性氧生成比较差异无统计学意义(P>0.05),而AEGs组(69.31±8.47)%活

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