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目的 评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用.方法 新生SD大鼠,培养原代皮质神经元,以1×106个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔),采用随机数字表法,分为4组(n=15):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、七氟醚预处理组(SP组)和HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇组(H组).采用氧糖缺失90 min,复氧复糖24 h的方法制备皮质神经元缺氧复氧损伤模型;SP组通人2.0%七氟醚2h,随后采用PBS洗涤3次,每次5 min,结束后立即制备缺氧复氧损伤模型;H组加入5 μmol/L2-甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理.采用膜联蛋白V/碘化丙啶双染流式细胞术检测神经元凋亡情况,采用免疫蛋白印迹法测定神经元Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3的表达水平.结果 与C组比较,A/R组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05);与A/R组比较,SP组和H组神经元凋亡率降低,SP组Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达下调(P<0.05);与SP组比较,H组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05).结论 HIF-1α介导了七氟醚预处理减轻大鼠神经元凋亡的过程,其机制与下调Bid、Bim和Puma表达有关.

作者:孙文波;张立民;康立娜;吴春玲;黄冬冬;孙秀伟

来源:中华麻醉学杂志 2015 年 35卷 4期

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作者:
孙文波;张立民;康立娜;吴春玲;黄冬冬;孙秀伟
来源:
中华麻醉学杂志 2015 年 35卷 4期
标签:
缺氧诱导因子1,α亚基 凋亡调节蛋白质类 麻醉药,吸入 缺血预处理 细胞低氧 氧 神经元 细胞凋亡 Hypoxia-inducible factor 1,alpha subunit Apoptosis regulatory proteins Anesthetics,inhalation Ischemic preconditioning Cell hypoxia Oxygen Neurons Apoptosis
目的 评价缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用.方法 新生SD大鼠,培养原代皮质神经元,以1×106个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔),采用随机数字表法,分为4组(n=15):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、七氟醚预处理组(SP组)和HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇组(H组).采用氧糖缺失90 min,复氧复糖24 h的方法制备皮质神经元缺氧复氧损伤模型;SP组通人2.0%七氟醚2h,随后采用PBS洗涤3次,每次5 min,结束后立即制备缺氧复氧损伤模型;H组加入5 μmol/L2-甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理.采用膜联蛋白V/碘化丙啶双染流式细胞术检测神经元凋亡情况,采用免疫蛋白印迹法测定神经元Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3的表达水平.结果 与C组比较,A/R组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05);与A/R组比较,SP组和H组神经元凋亡率降低,SP组Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达下调(P<0.05);与SP组比较,H组神经元凋亡率升高,Bid、Bim、Puma和活化的caspase-3表达上调(P<0.05).结论 HIF-1α介导了七氟醚预处理减轻大鼠神经元凋亡的过程,其机制与下调Bid、Bim和Puma表达有关.

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