目的：评价缺氧诱导因子?1α（ HIF?1α）在七氟醚预处理减轻大鼠皮质神经元凋亡中的作用及其与Slit2∕Robo信号通路的关系。方法新生SD大鼠，培养原代皮质神经元，以1×106∕ml的细胞密度接种于6孔板（2 ml∕孔）或96孔板（100μl∕孔），采用随机数字表法，分为4组（ n＝24）：正常对照组（ C组）、缺氧复氧组（ A∕R组）、七氟醚预处理组（ SP组）和HIF?1α抑制剂2?甲氧基雌二醇组（ H组）。采用氧糖缺失90 min 复氧复糖24 h的方法制备神经元缺氧复氧损伤模型；SP 组通入2．0％七氟醚2 h，随后采用PBS洗涤3次，每次5 min，结束后立即进行缺氧复氧；H组加入5μmol∕L 2?甲氧基雌二醇孵育72 h时进行七氟醚预处理。采用膜联蛋白Ⅴ∕碘化丙啶双染流式细胞术检测细胞凋亡情况，采用比色法检测乳酸脱氢酶（ LDH ）漏出水平，分别采用免疫印迹法和实时定量荧光PCR法测定Slit2、Robo1和Robo4及其mRNA的表达水平。结果与C组比较，A∕R组LDH漏出率和细胞凋亡率升高，Slit2和Robo1及其mRNA的表达上调（ P＜0．05），Robo4及其mRNA的表达差异无统计学意义（ P＞0．05）；与A∕R组比较，SP组和H组LDH漏出率和细胞凋亡率降低，SP组Slit2和Robo1及其mRNA的表达上调（ P＜0．05），Robo4及其mRNA的表达差异无统计学意
作者：孙文波；张立民；康立娜；吴金光；吕建敏；黄冬冬；孙秀伟
来源：中华麻醉学杂志 2015 年 5期
