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目的:评价细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2在谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡中的作用。方法:PC12细胞采用随机数字表法分为6组( n=21):对照组(C组)、谷氨酸组(Glu组)、谷氨酸+ERK1/2过表达组(Glu+ERK1/2-OE组)、谷氨酸+ERK1/2质粒空载体组(Glu+Vec组)、谷氨酸+ERK1/2敲减组(Glu+si-ERK1/2组)和谷氨酸+ERK1/2 SiRNA阴性对照组(Glu+si-NC组)。Glu组使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h,C组加入等量PBS缓冲液处理72 h,Glu+ERK1/2-OE组转染ERK1/2过表达质粒、Glu+Vec组转染质粒空载体、Glu+si-ERK1/2组转染ERK1/2 si-RNA、Glu+si-NC组转染siRNA阴性对照后48 h再使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h。采用酶标仪测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性、谷胱甘肽(GSH)、铁离子及丙二醛(MDA)含量,流式细胞仪测定线粒体膜电位(MMP)和脂质活性氧(Lip-ROS)水平。 结果:与C组比较,Glu组细胞存活率、GSH含量和MMP下降,LDH活性、铁离子、MDA含量和Lip-ROS水平升高( P<0.05);与Glu+Vec组比较,Glu+ERK1/2-OE组细胞存活率,GSH含量及MMP升高,LDH活性、铁离子、MDA含量及Lip-ROS水平降低( P<0.05);与Glu+si-NC组比较,Glu+si-ERK1/2组细胞存活率、GSH含量及MMP降低,LDH活性

作者:黄炎;刘卓懿;张倩;周婉晴;夏萍萍;叶治;李春玲

来源:中华麻醉学杂志 2023 年 43卷 8期

知识库介绍

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作者:
黄炎;刘卓懿;张倩;周婉晴;夏萍萍;叶治;李春玲
来源:
中华麻醉学杂志 2023 年 43卷 8期
标签:
MAP激酶信号系统 谷氨酸 PC12细胞 铁死亡 MAP kinase signaling system Glutamic acid PC12 cells Ferroptosis
目的:评价细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2在谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡中的作用。方法:PC12细胞采用随机数字表法分为6组( n=21):对照组(C组)、谷氨酸组(Glu组)、谷氨酸+ERK1/2过表达组(Glu+ERK1/2-OE组)、谷氨酸+ERK1/2质粒空载体组(Glu+Vec组)、谷氨酸+ERK1/2敲减组(Glu+si-ERK1/2组)和谷氨酸+ERK1/2 SiRNA阴性对照组(Glu+si-NC组)。Glu组使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h,C组加入等量PBS缓冲液处理72 h,Glu+ERK1/2-OE组转染ERK1/2过表达质粒、Glu+Vec组转染质粒空载体、Glu+si-ERK1/2组转染ERK1/2 si-RNA、Glu+si-NC组转染siRNA阴性对照后48 h再使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h。采用酶标仪测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性、谷胱甘肽(GSH)、铁离子及丙二醛(MDA)含量,流式细胞仪测定线粒体膜电位(MMP)和脂质活性氧(Lip-ROS)水平。 结果:与C组比较,Glu组细胞存活率、GSH含量和MMP下降,LDH活性、铁离子、MDA含量和Lip-ROS水平升高( P<0.05);与Glu+Vec组比较,Glu+ERK1/2-OE组细胞存活率,GSH含量及MMP升高,LDH活性、铁离子、MDA含量及Lip-ROS水平降低( P<0.05);与Glu+si-NC组比较,Glu+si-ERK1/2组细胞存活率、GSH含量及MMP降低,LDH活性

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