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目的克隆人护骨素(OPG)成熟肽段编码区基因并研究在大肠杆菌中OPG-谷胱甘肽转硫酶(GST)的融合蛋白的表达.方法采用RT-PCR从人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA中扩增OPG成熟肽段编码区cDNA,构建原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌后经0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,以SDS-PAGE电泳及Western印迹鉴定蛋白表达,应用谷胱甘肽-Sepharose 4B柱亲和层析纯化目的蛋白.结果获得人OPG成熟肽段编码区cDNA,转化菌株可表达人OPG-GST融合蛋白,蛋白表达量约为菌体总蛋白的15.5
作者：刘继中；纪宗玲；胡蕴玉；陈苏民；陶惠人
来源：中华内分泌代谢杂志 2003 年 19卷 4期
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