目的:探讨体外诱导脂肪干细胞(ADSCs)向Leydig细胞分化的可能性和条件. 方法:应用Ⅰ型胶原酶消化法分离人皮下脂肪组织中ADSCs,原代培养,适时传代.免疫组化方法检测波形蛋白的表达.以人绒毛膜促性腺激素(hCG)不同浓度及不同作用时间进行诱导后,实时荧光PCR检测类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因的表达.MTT法测定hCG诱导下的细胞增殖情况.在hCG、DMSO诱导1周后行3β-HSD免疫组化染色,并采用放射免疫法检测其培养上清及细胞裂解液的睾酮水平. 结果:ADSCs增殖迅速,ADSCs波形蛋白呈黄褐色阳性表达;ADSCs中StAR基因的表达在一定范围内与hCG诱导浓度的增加成正相关,hCG 10 U/ml达到高峰,该浓度诱导1周内StAR表达随时间延长而增加;hCG诱导增加ADSCs细胞增殖;hCG 10 U/ml、DMS0 3.2×10-6mol/L条件下诱导1周后细胞中3β-HSD免疫组化染色可见胞质呈浅褐色弱阳性,且该条件下细胞裂解液睾酮测定值明显高于其它组. 结论:①hCG在一定范围内促进ADSCs的StAR基因表达;②hCG可以促进ADSCs增殖;③在hCG 10 U/ml、DMS0 3.2×10 -6mol/L诱导下,人ADSCs有向Leydig细胞分化的可能.
作者:王玉芸;曾莉;李凯;张洁;林苹;黄鲁刚
来源:中华男科学杂志 2012 年 18卷 9期