目的 探讨DKK3在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及其对黑素瘤细胞A375增殖与凋亡的影响.方法 通过反转录(RT)-PCR及实时定量PCR分析DKK3mRNA在人恶性黑素瘤细胞系HM、A375、WM451、WM35、SK-MEL-1、Hs-695T和MDA-MB-435s及38例原发性黑素瘤、4例转移性黑素瘤和20例色素痣组织中的相对表达.分别转染恶性黑素瘤A375细胞pcDNA3.1(+)-Flag-DKK3质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组),RT-PCR验证DKK3的过表达;通过CCK8法和平板克隆实验分析DKK3对A375细胞增殖的影响,流式细胞仪分析DKK3对A375细胞凋亡的影响,Western印迹检测A375细胞周期和凋亡相关蛋白的表达.结果 DKK3 mRNA在WM35细胞系表达下调,HM、A375、WM451、SK-MEL-1和Hs-695T细胞系表达缺失,MDA-MB-435s细胞高表达.与色素痣相比,DKK3mRNA在人恶性黑素瘤组织表达降低(P＜ 0.001).与对照组A375细胞相比(100％),实验组A375细胞克隆形成效率明显受到抑制(23.22％±3.55％);同时转染后24、48、72 h细胞活性受到明显抑制(均P＜ 0.05).流式细胞仪检测发现,与对照组A375细胞(G1期,25.38％±2.92％)相比,实验组A375细胞明显阻滞于G1期(48.68％±3.92％,P＜0.001),细胞凋亡率明显升高(P＜ 0.001).与对照组A375细胞相比,实验组周期凋亡相关蛋

作者：李晶；余音；刘林红；黎智；刁庆春；王开振；肖亮；刘素桃

来源：中华皮肤科杂志 2017 年 50卷 12期