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目的 分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响.方法 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞增殖的影响;并通过qRT-实时聚合酶链反应(PCR)检测自噬基因LC3B、Atg5、Beclin1 mRNA水平的变化,及Western blot检测他克莫司和西罗莫司诱导的自噬相关蛋白LC3B、Atg5、Beclin1和p-ULK1的表达;同时流式细胞术也分析了在hUC-MSC产生细胞自噬的状态下趋化因子受体CXCR4的分泌.结果 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司并不引起hUC-MSC细胞表面标志物分子的表达明显改变,且低剂量的他克莫司对hUC-MSC完全没有细胞毒性作用,而西罗莫司对hUC-MSC的细胞增殖有一定的抑制作用,24 h和48 h的存活率分别为73.66%或68.81%,P<O.05具有统计学意义.他克莫司和西罗莫司都能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活hUC-MSC自噬,自噬相关蛋白LC3B、Atg5和Beclin1表达显著上调,并诱导CXCR4分泌上调.结论 低剂量免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司能诱导人脐带间充质干细胞hUC-MSC产生自噬并促进CXCR4的分泌.

作者:雷艳;赵红州;李荣春;付云烽;施小华;林娜;陈津;詹世淮;谭建明;黄梁浒

来源:中华器官移植杂志 2017 年 38卷 1期

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雷艳;赵红州;李荣春;付云烽;施小华;林娜;陈津;詹世淮;谭建明;黄梁浒
来源:
中华器官移植杂志 2017 年 38卷 1期
标签:
他克莫司 西罗莫司 间充质干细胞 细胞自噬 CXCR4 Tacrolimus Rapamycin Mesenchymal stem cells Autophagy Chemokine receptor-4
目的 分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响.方法 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞增殖的影响;并通过qRT-实时聚合酶链反应(PCR)检测自噬基因LC3B、Atg5、Beclin1 mRNA水平的变化,及Western blot检测他克莫司和西罗莫司诱导的自噬相关蛋白LC3B、Atg5、Beclin1和p-ULK1的表达;同时流式细胞术也分析了在hUC-MSC产生细胞自噬的状态下趋化因子受体CXCR4的分泌.结果 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司并不引起hUC-MSC细胞表面标志物分子的表达明显改变,且低剂量的他克莫司对hUC-MSC完全没有细胞毒性作用,而西罗莫司对hUC-MSC的细胞增殖有一定的抑制作用,24 h和48 h的存活率分别为73.66%或68.81%,P<O.05具有统计学意义.他克莫司和西罗莫司都能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活hUC-MSC自噬,自噬相关蛋白LC3B、Atg5和Beclin1表达显著上调,并诱导CXCR4分泌上调.结论 低剂量免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司能诱导人脐带间充质干细胞hUC-MSC产生自噬并促进CXCR4的分泌.

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