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目的 检测缺氧环境下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)表达变化,探讨氯化钴诱导缺氧对血管周细胞Ang-1表达的影响.方法 体外培养人脑血管周细胞,予不同浓度氯化钴诱导缺氧环境,分为对照组和试验组.对照组使用不含氯化钴的血管周细胞培养基培养;试验组使用血管周细胞培养基溶解六水合氯化钴稀释至终浓度分别为50μmol/L(50μmol/L氯化钴组)、100 μmol/L(100 μmol/L氯化钴组)、200 μmol/L(200 μmol/L氯化钴组)、300 μmol/L(300 μmol/L氯化钴组)、400 μmol/L(400 μmol/L氯化钴组).通过蛋白质印迹法检测HIF-1α蛋白表达、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α、Ang-1 mRNA合成以及酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测VEGF、Ang-1蛋白分泌.对数据行单因素方差分析、Dunnett-t检验及t检验.结果 对照组和各试验组(50、100、200、300、400μmol/L氯化钴组)HIF-1α蛋白表达组间差异有统计学意义(F=215.7,P<0.05);HIF-1 0蛋白表达随氯化钴浓度先升高后降低,在200 μmol/L处相对灰度达到峰值8.6140±0.3445,200 μmol/L氯化钴组相对灰度值与对照组,50、100、300、400 μmol/L氯化钴组比较,差异均有统计学意义(t=38.28、22.18、10.16、5.60、25.47,P值均小于0.05).

作者:张迪;胡艳阁;耿乐乐;方勇

来源:中华损伤与修复杂志(电子版) 2018 年 13卷 6期

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作者:
张迪;胡艳阁;耿乐乐;方勇
来源:
中华损伤与修复杂志(电子版) 2018 年 13卷 6期
标签:
缺氧 缺氧诱导因子1 血管生成素1 血管内皮生长因子类 氯化钴 血管周细胞 Anoxia Hypoxia-inducible factor 1 Angiopoietin-1 Vascular endothelial growth factor Cobalt chloride Pericytes
目的 检测缺氧环境下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)表达变化,探讨氯化钴诱导缺氧对血管周细胞Ang-1表达的影响.方法 体外培养人脑血管周细胞,予不同浓度氯化钴诱导缺氧环境,分为对照组和试验组.对照组使用不含氯化钴的血管周细胞培养基培养;试验组使用血管周细胞培养基溶解六水合氯化钴稀释至终浓度分别为50μmol/L(50μmol/L氯化钴组)、100 μmol/L(100 μmol/L氯化钴组)、200 μmol/L(200 μmol/L氯化钴组)、300 μmol/L(300 μmol/L氯化钴组)、400 μmol/L(400 μmol/L氯化钴组).通过蛋白质印迹法检测HIF-1α蛋白表达、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α、Ang-1 mRNA合成以及酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测VEGF、Ang-1蛋白分泌.对数据行单因素方差分析、Dunnett-t检验及t检验.结果 对照组和各试验组(50、100、200、300、400μmol/L氯化钴组)HIF-1α蛋白表达组间差异有统计学意义(F=215.7,P<0.05);HIF-1 0蛋白表达随氯化钴浓度先升高后降低,在200 μmol/L处相对灰度达到峰值8.6140±0.3445,200 μmol/L氯化钴组相对灰度值与对照组,50、100、300、400 μmol/L氯化钴组比较,差异均有统计学意义(t=38.28、22.18、10.16、5.60、25.47,P值均小于0.05).

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