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目的 建立同时检测A、B、C三型鼻病毒逆转录实时荧光定量聚合酶链(RT-PCR)方法,并检测临床样本.方法 合成能够同时检测A、B、C三型鼻病毒的引物和探针,制备RNA标准品并建立标准曲线,检测灵敏度、特异性和重复性,并对222份临床标本进行回顾性检测.结果鼻病毒A、B、C三型的线性范围分别是109~10拷贝/μl、109 ~ 10拷贝/μl、109~103拷贝/μl,标准曲线相关系数分别是0.999、0.997、0.999,扩增效率分别是96.10%、93.45%、96.98%.组内CV值小于3%.RT-PCR方法的检出率是27.02%,与传统PCR结果对比,RT-PCR方法的敏感性和特异性分别是100%和98.18%.结论 该RT-PCR方法是灵敏度、特异性和重复性均较好的能够同时检测鼻病毒A、B、C三型的分子诊断方法.

作者:周杰英;孙亚萍;曹海燕;谢志萍;段招军;曹友德

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2014 年 28卷 2期

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作者:
周杰英;孙亚萍;曹海燕;谢志萍;段招军;曹友德
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2014 年 28卷 2期
标签:
鼻病毒属 聚合酶链反应 Rhinovirus Polymerase chain reaction
目的 建立同时检测A、B、C三型鼻病毒逆转录实时荧光定量聚合酶链(RT-PCR)方法,并检测临床样本.方法 合成能够同时检测A、B、C三型鼻病毒的引物和探针,制备RNA标准品并建立标准曲线,检测灵敏度、特异性和重复性,并对222份临床标本进行回顾性检测.结果鼻病毒A、B、C三型的线性范围分别是109~10拷贝/μl、109 ~ 10拷贝/μl、109~103拷贝/μl,标准曲线相关系数分别是0.999、0.997、0.999,扩增效率分别是96.10%、93.45%、96.98%.组内CV值小于3%.RT-PCR方法的检出率是27.02%,与传统PCR结果对比,RT-PCR方法的敏感性和特异性分别是100%和98.18%.结论 该RT-PCR方法是灵敏度、特异性和重复性均较好的能够同时检测鼻病毒A、B、C三型的分子诊断方法.

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