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目的：表达人乳头瘤HPV33型病毒癌蛋白E6E7，并免疫小鼠制备抗体。方法从HPV33型基因组中扩增出E6 E7的基因片段，通过基因测序加以证实；将其克隆至原核表达载体pET28a中，在大肠埃希菌中经IPTG诱导表达，经HIS亲核层析对重组蛋白进行纯化，收集重组蛋白免疫的小鼠阳性血清，经ProteinA／G亲核层析柱纯化得到多克隆抗体，同时将E6 E7克隆至真核表达载体pCDNA3.1／His C中，转染293细胞，分别采用免疫荧光法和Western Blot检测抗体的特异性。结果用得到高纯度的重组蛋白E6、E7制备的多克隆抗体，具有良好的特异性。结论这种高纯度重组E6、E7蛋白和抗体有望用于HPV33型人乳头瘤疾病的临床检测及发生机制的研究。
作者：卢钧雄；段炼；王若伦；易俊波
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2016 年 1期
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