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目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质细胞(BMSCs)的表达能力。方法取6周龄新西兰白兔BMSCs,传代培养后以3 μl 阳离子脂质体(Lipofectamine)∶1 μg pcDNA3-TGF-β1的比例转染,通过免疫组织化学染色及图像分析对3组15份样本检测TGF-β1表达水平;利用水貂肺上皮细胞生长抑制法检测TGF-β1生物活性,分析转染的量效关系和时效关系。结果 瞬时表达组转染后48 h免疫组织化学染色部分细胞呈强阳性,稳定表达组全部细胞呈强阳性且表达持续4周以上。图像分析显示转染细胞TGF-β1表达显著增强,与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。量效关系显示,在转染体系中pcDNA3-TGF-β1(μg)∶阳离子脂质体(μl)为1∶3时,TGF-β1表达效率最高;时效关系显示,稳定表达组TGF-β1表达活性较瞬时表达组更强。TGF-β1基因转染可使BMSCs有效地表达活性TGF-β1而产生生物效应。

作者:郑启新;易诚青;郭晓东;刘勇;刘苏南

来源:中华实验外科杂志 2001 年 18卷 4期

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作者:
郑启新;易诚青;郭晓东;刘勇;刘苏南
来源:
中华实验外科杂志 2001 年 18卷 4期
标签:
转化生长因子-β1 基因转染 骨髓基质细胞
目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质细胞(BMSCs)的表达能力。方法取6周龄新西兰白兔BMSCs,传代培养后以3 μl 阳离子脂质体(Lipofectamine)∶1 μg pcDNA3-TGF-β1的比例转染,通过免疫组织化学染色及图像分析对3组15份样本检测TGF-β1表达水平;利用水貂肺上皮细胞生长抑制法检测TGF-β1生物活性,分析转染的量效关系和时效关系。结果 瞬时表达组转染后48 h免疫组织化学染色部分细胞呈强阳性,稳定表达组全部细胞呈强阳性且表达持续4周以上。图像分析显示转染细胞TGF-β1表达显著增强,与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。量效关系显示,在转染体系中pcDNA3-TGF-β1(μg)∶阳离子脂质体(μl)为1∶3时,TGF-β1表达效率最高;时效关系显示,稳定表达组TGF-β1表达活性较瞬时表达组更强。TGF-β1基因转染可使BMSCs有效地表达活性TGF-β1而产生生物效应。

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