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目的 探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性. 方法 分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1 MP质粒转染角膜内皮细胞48 h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亚群分化的影响.结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达.瞬时转染48 h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组.在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25+、CD69+、CD71+阳性细胞比率下降. 结论 基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡.

作者:马慧香;徐锦堂;姜振友;赵松滨;陈建苏

来源:眼科研究 2007 年 25卷 7期

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作者:
马慧香;徐锦堂;姜振友;赵松滨;陈建苏
来源:
眼科研究 2007 年 25卷 7期
标签:
转化生长因子-β1 基因转染 淋巴细胞 免疫
目的 探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性. 方法 分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1 MP质粒转染角膜内皮细胞48 h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亚群分化的影响.结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达.瞬时转染48 h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组.在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25+、CD69+、CD71+阳性细胞比率下降. 结论 基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡.

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